本发明属于农药残留测定技术领域,涉及一种蔬果农药残留前处理方法,尤其涉及一种蔬果中有机磷农药残留测定的提取净化方法,经过取样、加入乙腈提取液、过MycoSep 226 AflaZon+小柱净化等步骤后待测定。本发明的方法,减少了有机试剂的用量,且不需用到氮吹或旋蒸设备;缩减了常规方法对有机磷的检测步骤及人力,提升了检测效率;明显提升有机磷提取液的净化程度,所得进样液清澈透明,且多次进样后对检测系统无明显污染,仪器设备灵敏度一致,检出限不变;即使是极性较强的有机磷农药如甲胺磷、乙酰甲胺磷、久效磷、氧化乐果等,多次进样后峰高不减、峰形不变。在农药残留测定技术领域具有良好的应用前景。
1.一种蔬果中有机磷农药残留测定的提取净化方法,其特征在于:依次由下述步骤组成,A.称取磨碎的果蔬样品于离心管中;B.加入乙腈提取液;C.用匀浆机进行分散萃取,再加入氯化钠,盖上盖子剧烈振摇;D.静止,待分层明晰后净化;E.取上清液,过MycoSepxa0226xa0AflaZon+小柱净化;F.取净化后的乙腈提取液于进样瓶中,待上机测定。
2.根据权利要求1所述的一种蔬果中有机磷农药残留测定的提取净化方法,其特征在于:依次由下述步骤组成,A.准确称取25g磨碎的果蔬样品于100ml离心管中;B.准确加入50ml乙腈提取液;C.用匀浆机以10kr/min的转速进行分散萃取1min,再加入5g氯化钠,盖上盖子剧烈振摇10s;D.静止30~45min,待分层明晰后净化;E.取10ml上清液,过MycoSepxa0226xa0AflaZon+小柱净化;F.取净化后的乙腈提取液1ml于进样瓶中,待上机测定。技术领域
本发明属于农药残留测定技术领域,涉及一种蔬果农药残留前处理方法,尤其涉及一种蔬果中有机磷农药残留测定的提取净化方法。
背景技术
水果、蔬菜是人们日常生活中重要食源,随着人们生活品质的提高,对食品安全意识不断增强,特别是近年来食品安全问题频发,更激发了大众对水果、蔬菜中农药残留问题的敏感。水果、蔬菜中农药残留是老生常谈的问题,在有机氯杀虫剂已经停用的情况,有机磷农药成为蔬菜中主要农药污染源,即便是超市,也无法保证安全。大量残留在蔬菜上的农药不仅对人体产生直接毒害,引起急性中毒或导致农药在人体内的积累和富集,从而引发各种疾病,甚至影响后代。而且还会导致有害物质对生态环境造成严重的污染与危害。但就像人不能在绝对无菌的环境中生存一样,绝对无农药无残留的食品必将会有新的问题,因此我们应做好水果、蔬菜中有机磷农药残留检测,让人们吃上安全、健康的放心食品。目前有关水果、蔬菜中有机磷农药残留检测的前处理方法报道较多,并主要体现在提取液配置及提取后的净化处理上。其中目前应用最为广泛的是NY/T761-2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》[NY/Txa0761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定[S].中国农业出版社,2008,5],方法规定有机磷农药提取试剂为乙腈,而后提取液经旋干、丙酮定容后待上仪器测定,该方法具有普适性,但由于对提取液的净化效率较为低下,更适合样品本底较少,背景较为干净的样品,而对一些提取液颜色深或本地成份复杂的样品不实用,主要体现在这些样品在进样时造成了对检测设备的极大污染,以致仪器灵敏度下降,特别是对一些极性较强的有机磷如甲胺磷、久效磷、氧化乐果等下降幅度更大,这样不仅增大了方法的检出限,还会对仪器部件如进样口配件、色谱柱等造成极大损耗,甚至缩短仪器寿命。鉴于此,有人通过改变提取液极性或增加净化步骤来加以改善。欧阳蒲月等人采用二氯甲烷、丙酮混合提取液提取了蔬菜中有机磷[欧阳蒲月,黄智璇,周金森,等.蔬菜中有机磷农药残留前处理技术初探[J].中国热带医学,2009,9(4):757-758,760];宋新国[宋新国.豇豆农药残留的提取方法.中国,2012,G01N30/06(2006.01)Ixa0G01N30/02(2006.01)I:1-5]采用了混合提取液,由乙腈25%、丙酮25%、乙醚25%、二氯甲烷25%按体积百分比组成,并在后续试验中增加了氨基柱净化步骤并引入了甲苯作为洗脱液提取测定了豇豆中农药残留。Huangxa0Zhiqiang[Zhiqiangxa0Huang,Yongjunxa0Li,Boxa0Chen.Simultaneousxa0determinationxa0of102pesticidexa0residuesxa0inxa0Chinesexa0teasxa0byxa0gasxa0chromatography-massxa0spectrometry[J].Journalxa0ofxa0Chromatographyxa0B,2007,853(1-2):154-162.]等人采用凝胶渗透色谱法及固相萃取法提取了茶叶中多种有机磷农药。这些改进均对NY/Txa0761-2008进行了有力的延伸和拓展,使得有机磷检测技术得到了极大提升。但这些经改进的各种方案,如混合提取液虽能提高各种农药的提取效率,但同时也增加了对非目标物的提取量,而这些非目标物必然是检测方法的累赘。各种固相萃取净化小柱的应用势必额外增加有机试剂的用量,增加对环境污染,同时增加方法应用步骤,增大检测劳动量。
发明内容
本发明发现有一种净化小柱(MycoSepxa0226xa0AflaZon+净化小柱)可直接应用于水果、蔬菜有机磷农药残留检测中净化有机磷的乙腈提取液,即在经NY/Txa0761-2008方法对有机磷进行提取后的乙腈提取液直接过滤于该小柱内,所得的净化后的乙腈提取液清澈透明,可直接用于上机测试。其中,MycoSepxa0226AflaZon+净化小柱是MycoSep系列免疫亲和小柱,市面上有售,现有技术中主要用于多种单端孢霉烯族毒素类化合物的同时分析。而本发明将其引入农药残留测定前处理方法中。为了解决上述技术问题,本发明通过下述技术方案得以解决:一种蔬果中有机磷农药残留测定的提取净化方法,依次由下述步骤组成,A.称取磨碎的果蔬样品于离心管中;B.加入乙腈提取液;C.用匀浆机进行分散萃取,再加入氯化钠,盖上盖子剧烈振摇;D.静止,待分层明晰后净化;E.取上清液,过MycoSepxa0226xa0AflaZon+小柱净化;F.取净化后的乙腈提取液于进样瓶中,待上机测定。作为优选,依次由下述步骤组成,A.准确称取25g磨碎的果蔬样品于100ml离心管中;B.准确加入50ml乙腈提取液;C.用匀浆机以10kr/min的转速进行分散萃取1min,再加入5g氯化钠,盖上盖子剧烈振摇10s;D.静止30~45min,待分层明晰后净化;E.取10ml上清液,过MycoSepxa0226xa0AflaZon+小柱净化;F.取净化后的乙腈提取液1ml于进样瓶中,待上机测定。本发明提供了一种蔬果中有机磷农药残留测定的提取净化方法,减少了有机试剂的用量,且不需用到氮吹或旋蒸设备;缩减了常规方法对有机磷的检测步骤及人力,提升了检测效率;明显提升有机磷提取液的净化程度,所得进样液清澈透明,且多次进样后对检测系统无明显污染,仪器设备灵敏度一致,检出限不变;即使是极性较强的有机磷农药如甲胺磷、乙酰甲胺磷、久效磷、氧化乐果等,多次进样后峰高不减、峰形不变;同时还明显降低了气相色谱相关耗材的消耗程度,延长了毛细管柱的使用时间及气相色谱仪的使用寿命。在农药残留测定技术领域具有良好的应用前景。
附图说明
图1为本发明的有机磷的乙腈提取液净化过程示意图。图2为实施例2中杨梅加标回收色谱图。图3为实施例2中黄瓜加标回收色谱图。图4为实施例2中辣椒加标回收色谱图。图5为实施例2中现有技术方法辣椒不过柱净化加标回收色谱图。
具体实施方式
下面结合实施例与附图对本发明作进一步详细描述。实施例1一种蔬果中有机磷农药残留测定的提取净化方法,以杨梅为例,如图1所示,依次由下述步骤组成:A.准确称取25g磨碎的果蔬样品于100ml离心管中;B.准确加入50ml乙腈提取液;C.用匀浆机以10kr/min的转速进行分散萃取1min,再加入5g氯化钠,盖上盖子剧烈振摇10s;D.静止30min,待分层明晰后净化;E.取10ml上清液,过MycoSepxa0226xa0AflaZon+小柱净化;F.取净化后的乙腈提取液1ml于进样瓶中,待上机测定。经MycoSepxa0226xa0AflaZon+净化小柱净化后的乙腈提取液无色透明,可显著降低对仪器的污染程度。实施例2一种蔬果中有机磷农药残留测定的提取净化方法,在杨梅、黄瓜、辣椒添加质量浓度为0.08mg/kg的敌敌畏、丙溴磷、乙酰甲胺磷、治螟磷、甲拌磷、氧化乐果、二嗪磷、久效磷、除线磷、乐果、皮蝇磷、对硫磷、倍硫磷、异柳磷、水胺硫磷、喹硫磷、杀扑磷、乙硫磷、硫环磷等19种有机磷农药,在以下色谱条件下所得的加标回收谱图,结果如图2至4所示。现有技术中不经MycoSepxa0226xa0AflaZon+净化小柱净化的黄瓜样品加标回收连续进样第10针的色谱图,添加农药种类、浓度与本发明的一致。如图5所示。并将本发明的结果谱图与现有技术相对比,说明本发明的方法能以更简便的方法达到现有技术中的效果。色谱条件:进样口:220°C,不分流进样;进样量:1μl;色谱柱:DB17弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm,0.25μm);程序升温:80°C(0.5min)~240°C/20°C(10min);检测器:250°C;隔垫吹扫:2ml/min;载流:1ml/min;氢气:40ml/min;空气:100ml/min;尾吹:30ml/min。对比结果:经过对比谱图可知,本发明的提取净化方法比现有技术减少了有机试剂的用量,且不需用到氮吹或旋蒸设备;缩减了常规方法对有机磷的检测步骤及人力,提升了检测效率;明显提升有机磷提取液的净化程度,所得进样液清澈透明,且多次进样后对检测系统无明显污染,仪器设备灵敏度一致,检出限不变;即使是极性较强的有机磷农药如甲胺磷、乙酰甲胺磷、久效磷、氧化乐果等,多次进样后峰高不减、峰形不变;同时还明显降低了气相色谱相关耗材的消耗程度,延长了毛细管柱的使用时间及气相色谱仪的使用寿命。说明本发明的方法明显优于现有技术的测定前处理方法。总之,以上所述仅为本发明的较佳实施例,凡依本发明申请专利范围所作的均等变化与修饰,皆应属本发明专利的涵盖范围。